Gonadal steroids levels and vitellogenesis in the formation of oocytes in Prochilodus lineatus (Valenciennes) (Teleostei: Characiformes)

The objective of this study was to obtain information about the possible mechanisms related to poor reproductive performance in tropical rheophilic fish. To that effect, cages (Cs) and earthen ponds (EPs) were used as experimental systems to provide unsuitable and suitable conditions, respectively, for curimbatá (Prochilodus lineatus) breeders. Fish were maintained under experimental conditions for 18 months, and during this period females were randomly sampled every two months for biometric analysis (n=30), blood (n=5/sampling) and ovary (n=5/sampling). After this period EPs females (EPFs) and Cs females (CFs) were submitted to the induced breeding experiments. The results showed that rearing curimbatá for such long time in a cage at this stocking density, reduces its growth, plasma E2 levels and vitellogenesis. During vitellogenesis, the mean plasma estradiollevels of CFs were three times lower than those of EPFs (P<0.01). CFs presented poorer results than EPFs for all the examined parameters of reproductive performance. Taken together these data showed that the reduced estradiol levels during vitellogenesis (and the consequently less intense transition from the previtellogenic to vitellogenic phase) and reduced amounts of yolk are mechanisms associated with the formation of low quality oocytes and shortened and delayed breeding season in this species. Moreover, our data showed that the onset of vitellogenesis (six months before the spawning season) must be considered as a key period related to the formation of oocytes of good quality, and adequate management should be provided throughout the year.

Este estudo teve como objetivo gerar informações básicas sobre os possíveis mecanismos relacionados com os resultados desfavoráveis obtidos com o desempenho reprodutivo em peixes reofílicos tropicais. Para isso tanques-rede (Cs) e viveiros escavados (EPs) foram utilizados como sistemas experimentais para propociar respectivamente condições inadequadas e adequadas para reprodutores de Prochilodus lineatus. Os peixes foram mantidos por 18 meses em viveiros escavados (EPs) e tanques-rede (Cs), e durante este período, foram aleatoriamente coletados a cada dois meses para análise biométrica (n=30), coleta de sangue (n=5/tratamento) e amostragem do ovário (n=5/tratamento). Após este período as fêmeas mantidas em EPs (EPFs) e as fêmeas mantidas em Cs (CFs) foram submetidas aos experimentos de reprodução induzida. Os resultados mostraram que manter curimbatás por este período em Cs, na densidade de estocagem utilizada, reduz seu crescimento, níveis plasmáticos de E2 e vitelogênese. Durante a vitelogênese, os níveis plasmáticos de estradiol das CFs foram três vezes menores do que os das EPFs (P <0,01). As CFs apresentaram resultados inferiores aos das EPFs para todos os parâmetros analisados de desempenho reprodutivo. Em conjunto, estes dados mostram que os níveis reduzidos de estradiol durante a vitelogênese (bem como o consequente atraso na transição da fase previtelogênica para a vitelogênica) e as quantidades reduzidas de vitelo são mecanismos associados com a formação de ovócitos de baixa qualidade; redução e atraso na época de desova nesta espécie. Além disso, nossos dados mostraram que o início da vitelogênese (seis meses antes da época de desova) é um período-chave para formação de ovócitos de boa qualidade, e o manejo adequado deve ser aplicado durante todo o ano.

Fontes proteicas e idades de abate sobre a estrutura e ultraestrutura do intestino delgado de leitões desmamados / Sources of protein and slaughtering ages on the structure and ultra structure of the small intestine of weaned piglets

Foram realizados dois experimentos (experimento 1 - alimentação convencional e experimento 2 - alimentação das matrizes, a partir de 109 dias de gestação, na lactação e dos leitões lactentes com ração sem farelo de soja), com o objetivo de avaliar os efeitos de fontes proteicas (farelo de soja - FS, soja semi-integral extrusada - SSIE e produtos lácteos - PL) sobre a morfologia intestinal de leitões abatidos aos 0,5 e 15 dias após a desmama. Foram utilizados 27 leitões, desmamados aos 25 dias de idade, sendo que em cada idade, nove leitões foram abatidos. Utilizou-se o delineamento em blocos ao acaso, em esquema fatorial 3 x 3 (três dietas x três idades de abate). Os resultados demonstraram que os animais recebendo FS apresentaram menores alturas das vilosidades e relação vilosidade:cripta, quando comparados àqueles que receberam SSIE ou PL, não havendo, entretanto, diferenças entre estes. A altura da vilosidade e a relação vilosidade:cripta não foram afetadas pela alimentação diferenciada das matrizes e dos leitões antes da desmama. A profundidade das criptas não foi afetada pelas dietas ou idades de abate, dentro de cada experimento, em nenhum dos segmentos estudados, sendo, no entanto, menor no duodeno e maior no jejuno e íleo dos animais do exp. 2, quando comparados àqueles do exp. 1. Concluiu-se que o FS afetou negativamente a altura das vilosidades e a relação vilosidade:cripta após a desmama; que a morfologia intestinal foi mais afetada aos cinco dias, mostrando sinais de recuperação aos 15 dias após a desmama e que a alimentação das matrizes não afetou a morfologia dos segmentos do intestino delgado.

Two experiments (experiment 1 - conventional feeding and experiment 2 - feeding of the sows, starting at 109 days of pregnancy and during lactation, and the lactating piglets, with rations without soybean meal) were conducted to evaluate the effects of sources of protein (soybean meal-SBM, extruded semi-integral soybean-ESISB, and milk products-MP) on the intestinal morphology of piglets slaughtered at the 0, 5 and 15 days later at weaning. Twenty-seven piglets weaned with 25 days of age were used, being nine piglets slaughter in each slaughtering age. A 3 x 3 factorial (3 diets x 3 slaughtering ages) was studied, according to a randomized block design. The results showed that animals receiving SBM, presented lower values of villi height and villus:crypt ratio when compared to those that received ESISB or MP. The villi height and the villus:crypt ratio were not affected by the differential feeding of the sows and of the piglets before the weaning. The depth of the crypt was not affected by diets or slaughtering ages in none of the segments studied being, however, smaller in the duodenum and bigger in the jejunum and ileo of the animals of exp. 2. It was concluded that the SBM was the affected the height of the villi and the relationship villi:crypt negatively after it weans. The intestinal morphology was more affected at five days, showing signals of recovering at 15 days after weaning and that the feeding of the sows did not affect the morphology of the segments of the thin intestine.

Diferentes granulometrias de rações sobre o ganho de peso, crescimento, sobrevivência e reversão sexual para tilápias-do-Nilo (Oreochromis niloticus) / Different diameters of diets about weight gain, growing, survival and sex reversal to Nile tilapia (Oreochromis niloticus)

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de três diferentes granulometrias de rações fareladas (0,25, 0,35 e 0,50 mm) sobre o ganho de peso, crescimento, sobrevivência e proporção sexual para larvas de tilápia-do-Nilo (Oreochromis niloticus) aos 30, 60 e 90 dias de idade. Nos primeiros 30 dias de vida, as larvas foram revertidas com rações contendo hormônio 17 α-metiltestosterona na dosagem de 60 mg/kg de ração, respeitando-se as diferentes granulometrias e após este período, foram medidas, pesadas e contadas para cálculo da taxa de sobrevivência. Para as variáveis biométricas de peso e comprimento total, foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado (DIC), em parcelas subdivididas, com três tratamentos e três repetições, considerando-se parcelas as três granulometrias de ração e subparcelas as três idades. Ao término do estudo, os peixes alimentados com as granulometrias 0,35 e 0,25 mm, obtiveram os melhores resultados para o ganho de peso (14,42 g e 13,36 g) e comprimento total (83,13 mm e 82,72 mm), não diferindo estatisticamente e as rações com diâmetros de grão 0,50 e 0,35 mm resultaram em 96,66% e 93,33% de machos, respectivamente, após análise histológica das gônadas, sem diferenças estatísticas entre os tratamentos.

The aim of this work was to evaluate the effects of three different diameters of crumble diets (0.25, 0.35 and 0.50 mm) on weight gain, growing, survival and sexual proportion to Nile tilapia (Oreochromis niloticus) larvae with 30, 60 and 90 days of age. In the first 30 days of age larvae were submitted to sex reversion with diets containing the hormone 17 α-methyltestosterone in a dosage of 60mg/kg of ration, respecting the different diameters and after this period, larvae were measured, weighed and counted for calculation of survival taxes. For the biometrical parameters as weight and total length a completely randomized design was used in subdivided installments with three treatments and three repetitions, considering installments the three diameters of diet and the sub installments, the three ages. In the end of this study, fish fed with diets of grain diameters 0.35 and 0.25 mm obtained the best results for weight gain (14.42 g and 13.36 g) and total length (83.13 mm and 82.72 mm), although these results were not statistically significant, and diets with grain diameters 0.50 and 0.35 mm resulted in 96,66 % and 93,33% of males, respectively, after histological analysis of gonads, without statistics differences between the treatments.

Efetividade de métodos de identificação sexual em tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus) revertidas sexualmente com hormônio em ração com diferentes granulometrias / Effectiveness of methods of sexual identification in nile tilapia (Oreochromis niloticus) sexually reverted with hormone in diet with different diameters

Foram avaliados três métodos de identificação do sexo em tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus), nas idades de 30, 60 e 90 dias que foram revertidas mediante a administração do hormônio androgênico 17 alfa-metiltestosterona incorporado às rações fareladas com diferentes granulometrias (0,25, 0,35 e 0,50 mm) na dosagem de 60 mg/kg de ração. As técnicas de sexagem testadas foram: exame macroscópico da papila urogenital, exame microscópico das gônadas coradas a fresco com acetato-carmim e exame microscópico das gônadas pela rotina histológica. Perante os três métodos de sexagem avaliados, a histologia das gônadas obteve o diagnóstico mais seguro. As granulometrias das rações utilizadas não interferiram nas características morfológicas das gônadas, nem nos caracteres sexuais secundários dos peixes.

Three methods of sexual identification were evaluated in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) at ages of 30, 60 and 90 days that were submitted to sexual reversion under administration of androgen hormone 17 alpha-methyltestosterone added to crumble diets with different granules sizes (0.25, 0.35 and 0.50 mm) in dosage of 60mg/kg. The techniques of sexual identification employed were: a) Macroscopic examination of urogenital papilla; b) Microscopic examination of gonads through stain with carmine-acetate and c) Microscopic examination of gonads through histological routine. In the presence of three methods of sexual identification evaluated, histology of gonads has shown the most confident diagnosis. The grain diameters of rations did not interfere in morphological characteristics of gonads, neither in secondary sexual characters of fish.

Histologia do rim, fígado e intestino de girinos de rã-touro (Rana catesbeiana) alimentados com dietas contendo própolis / Histology of kidney, liver and intestine of bullfrog tadpoles (Rana catesbeiana) fed with diets containing propolis

Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência de possíveis alterações no fígado, rim e intestino de girinos de rã-touro no estágio 42, alimentados com dietas contendo diferentes concentrações (0,0; 0,2; 0,5; 1,0; e 1,5 por cento) de extrato hidroalcoólico de própolis. O experimento foi conduzido no laboratório de Nutrição de Organismos Aquáticos do Centro de Aqüicultura da UNESP, onde foram utilizados 1.400 girinos no estágio 26, distribuídos em vinte tanques experimentais. No final do experimento (60 dias), foram sacrificados três girinos de cada repetição e retiradas amostras de rim, fígado e intestino para processamento de lâminas histológicas no Laboratório de Histologia do Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal da FCAV - UNESP. As amostras foram fixadas, desidratadas, coradas com HE, analisadas, fotomicrografadas e medida a espessura do epitélio intestinal. Não foram observadas alterações histológicas no intestino, rins e fígado dos girinos. A espessura do epitélio do intestino dos mesmos não foi influenciada (P>0,05) pelas concentrações de própolis.

This research was aimed at verifying the occurrence of possible alterations in liver, kidney and intestine of bullfrog tadpoles in stage 42 fed with diets containing different concentrations (0.0; 0.2; 0.5; 1.0 and 1.5 percent) of propolis hydroalcoholic extract. The experiment was carried out in laboratory of Aquatic Organisms Nutrition from Aquaculture Center of UNESP, where 1,400 tadpoles in stage 26 were used and distributed in twenty experimental aquariums. In the end of experiment (60 days) three tadpoles from each repetition were sacrificed and kidney, liver and intestine samples were collected to processing of histological slices in Histology´s Laboratory pertaining to Department of Morphology and Physiology from FCAV - UNESP. Samples were fixed, dehydrated, stained in HE, analysed, photomicrographed and thickness of intestinal epithelium was measured. Histological disturbances in tadpoles´s intestine, kidneys and liver were not observed. Thickness of intestinal epithelium from the same ones was not influenced (P>0.05) by propolis concentrations.

Effect of probiotic and prebiotic inclusion in weaned piglet diets on structure and ultra-structure of small intestine

Foram utilizados 44 leitões desmamados, distribuídos em um delineamento em blocos casualizados, em esquema fatorial onde foram avaliadas cinco dietas: T1 – Dieta Basal; T2 - Dieta Basal + Antibiótico; T3 - Dieta Basal + Probiótico; T4 - Dieta Basal + Prebiótico; T5 - Dieta Basal + Simbiótico (T3+T4). Inicialmente foi abatido um grupo de quatro leitões ao desmame. Nos dias sete e 14 pós-desmame foram abatidos quatro leitões de cada tratamento. Foram coletados segmentos do intestino delgado, de cada animal, para análise microscópica de luz e eletrônica. Os microingredientes testados influenciaram a histologia intestinal dos leitões. Foi observada maior densidade de vilos na porção duodenal dos leitões que consumiram ração com prebiótico em relação aos que consumiram dieta com probiótico. Na porção do jejuno dos leitões recebendo ração contendo prebiótico houve, embora não significativa estatisticamente, maior densidade de vilos. Os animais recebendo ração com simbiótico apresentaram maior altura de microvilos aos 14 dias no duodeno em relação aos que consumiram a dieta basal. Nos leitões suplementados com probiótico houve melhor recuperação na densidade dos microvilos em relação às outras dietas que não mostraram diferenças entre as idades estudadas.

Morphometric alterations in hepatocytes and ultrastructural distribution of liver glycogen in pacu (Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887) during food restriction and refeeding

The morphometric alterations in hepatocytes and the ultrastructural distribution of tissue glycogen in pacu (Piaractus mesootamicus) were studied following food restriction and refeeding. Fish (200-300g) were allocated to control and experimental groups. The experimental group was sampled after 0, 2, 7, 30 and 60 days of food restriction and after 7 and 30 days of refeeding. The control group, which was fed daily, was sampled on the same days. The morphometric results were analyzed by ANOVA in a 2x7 (feeding x days) factorial design and the averages compared by the Tukey test. Transmission electron microscopy showed liver glycogen mobilization during food restriction. The levels of glycogen did not return to normal after up to 30 days of refeeding. There was a decrease in the cytoplasmic area and volume after seven days without food whereas changes in the nuclear area and volume appeared after two days of food restriction. Recovery of the nuclear and cytoplasmic area and volume occurred after 7 days and 30 days of refeeding, respectively. These results indicate tha liver glycogen supplies at least part of the energy requirement during food restriction in juvenile pacu. Thirty days of refeeding were not enough to re-establish the pre-restriction carbohydrate levels, probably because of the extra energy demand associated with the high metabolic rate that occurred during the compensatory process of refeeding at elevated ambient temperatures. However, the recovey seen in the morphometric parameters of the hepatocytes indicated a functional re-adjustment of the liver stimulated by the restored food supply.

Estudos hematológicos e hormonal de frangos de corte tratados com contaminantes do milho: Crotalaria spectabilis e Senna occidentalis / Hematological and hormonal studies from broiler chickens fed with corn contaminants: Crotalaria spectabilis e Senna occidentalis

Crotalaria spectabilis (crotalária) e a Senna occidentalis (fedegoso) podem crescer em plantaçöes de milho e, durante a colheita, este cereal pode ser contaminado com as sementes dessas plantas, que apresenta toxicidade para os animais. O objetivo deste estudo foi investigar os parâmetros morfométricos dos eritrócitos, as variáveis hematológicas e a concentraçäo plasmática hormonal dos frangos de corte tratados com raçäo de dois níveis de energia, que foi adicionada de 0,1 por cento e 0,5 por cento de sementes de Crotalaria spectabilis e Senna occidentalis, respectivamente. Cento e oitenta frangos de corte foram divididos em seis grupos, de acordo com uma análise fatorial 3 x 2 (controle, crotalária e fedegoso como tratamentos principais e dois níveis de energia, 2.900 e 3.200 kcal ME/kg de raçäo). Os resultados deste experimento mostraram que o efeito tóxico da crotalária determinou uma reduçäo no número de hemácias, no valor do hematócrito e do VCM, nao influenciando os parâmetros morfométricos avaliados. A semente de crotalária induziu, também, aumento na incidência de ascite, em funçäo de sua toxicidade hepática. Já a semente de fedegoso näo mostrou toxicidade suficiente para induzir ascite nos frangos